ОЛИГОПЕПТИДЫ №24 - Для оздоровления, укрепления и лечения болезней мышц

Показания: Дефицит массы тела. При саркопении. Дефицит роста
Состав: пептидный пул для оздоровления, укрепления, и лечения болезней мышц.

У молодых людей с дефицитом роста комплекс №24 способствует:

— нормализации роста и достижению конечного роста в пределах или выше генетически прогнозируемого;
— нормализации состава тела;
— повышению минеральной плотности костей и уменьшению риска возникновения переломов;— нормализации метаболических процессов;
— снижению факторов риска развития сердечно-сосудистых осложнений;
— нормализации репродуктивной функции;
— нормализации психологического состояния и жизненного тонуса.

Комплекс №24 – эффективный препарат у профессионалов и любителей спорта. Он лишен побочных эффектов, связанных с многими препаратами, включая гормон роста.

Комплекс №24 ускоряет выработку факторов роста и мышечную массу, а также активно регулирует метаболизм костной и жировой ткани организма.

Комплекс №24 угнетает активность ферментов, оказывающих разрушающее действие на аминокислоты. Также регулирует синтез коллагена в костной ткани и коже. Комплекс №24 увеличивает размер и количество клеток щитовидной железы, надпочечников, печени, половых желез, вилочковой железы и мышц.

Еще комплекс №24 действует на распад жиров.

Пептидный пул комплекса №24 препятствует развитию большого количества разрушительных процессов в организме человека и стимулирует восстановительные. Под действием комплекса №24 происходит омоложение организма на 10-20 лет.

Под действием комплекса №24 происходит:

— анаболический эффект за счет роста мышечной массы;
— уменьшения жировых отложений;
— укрепляется костная система;
— жировые отложения преобразуются в мышцы;
— усиливается иммунитет;
— повышаются умственные способности;
— снижается уровень холестерина в крови;
— увеличивается сексуальная активность.

Помимо влияния на рост мышц, комплекс №24 активизирует физическую и психическую деятельность организма в целом, повышается концентрация внимания, снижается чувство усталости, создается ощущение «Я могу все».

Комплекс №24 не имеет побочных эффектов и не вызывает привыкания.

Комплекс №24 принудительно активирует ТАК1 посредством влияния на сверхэкспрессию белков ТАК1 и ТАВ1, что вызывает гипертрофию мышц и синтез белка. Происходит гипертрофия миофибрилл. ТАК1 стимулирует механизм трансляции белка в скелетных мышцах. ТАК1 взаимодействует с Smad1 при денервации для предотвращения чрезмерной атрофии мышц. Принудительная активация ТАК1 с помощью комплекса №24 уменьшает вызванные денервацией истощение мышц.

Супрафизиологическая активация ТАК1 способствует росту скелетных мышц и смягчает нейрогенную атрофию.

Масса скелетных мышц регулируется посредством скоординированной активации нескольких сигнальных путей. Было обнаружено, что сигналосома ТАК1 активизируется при различных состояниях мышечной атрофии и гипертрофии. Далее по тексту мы демонстрируем, что супрафизиологическая активация ТАК1 в скелетных мышцах стимулирует механизм трансляции, синтез белка и рост миофибрилл. ТАК1 вызывает фосфорилирование фактора инициации удлинения 4Е (eIF4E) независимо от mTOR. Инактивация ТАК1 нарушает морфологию нервно-мышечных соединений и вызывает нарушение регуляции передачи сигналов Smad. Используя генетические подходы, мы демонстрируем, что ТАК1 предотвращает чрезмерную потерю мышечной массы во время денервации. ТАК1 способствует ядерной транслокаци Smad4 и удержанию Smad6 в цитоплазме. ТАК1 также необходимо для фосфорилирования eIF4E в денервированных скелетных мышцах. Исследования демонстрируют, что ТАК1 поддерживает рост скелетных мышц и предотвращает нейрогенную мышечную атрофию.

Скелетные мышцы являются наиболее распространенной тканью в организме человека, которая обеспечивает мобильность, а также служит местом хранения глюкозы, липидов и белка, которые используются для производства энергии в периоды катаболизма. Масса скелетных мышц регулируется посредством скоординированной активации катаболических и анаболических путей. Ось IGF1/Akt/mTOR была предложена в качестве основного сигнального пути, который стимулирует синтез белка, что приводит к росту скелетных мышц. Активация этого пути также ингибирует атрофию мышц путем подавления экспрессии различных атрогенов. Интересно, что более поздние исследования показали, что конститутивная активация mTOR C1 вызывает атрофию скелетных мышц и миопатии, не оказывая существенного влияния на синтез белка. Например, генетическая абляция ингибитора mTOR ТSC1 (комплекс туберозного склероза 1) усугубляет вызванную денервацией атрофию. Вызванное денервацией увеличение mTOR ингибирует Akt-киназу через механизм обратной связи, что, в свою очередь, приводит к активации факторов транскрипции О подсемейства Forkhead Box (FoxO) и увеличению экспрессии генов убиквитинлигаз Е3, MAFbx и MuRF1.

Более того, устойчивая активация mTORС1 ингибирует аутофагию в скелетных мышцах, что приводит к возникновению миопатий на более поздних стадиях. Кроме того, было обнаружено, что острая активация или подавление mTORС1 нарушает регуляцию аутофагии и нарушает гомеостаз мышечной массы в денервированной мышце. Кроме того, mTORС1 потенциально способствует возрастной атрофии мышц за счет усиления фосфорилирования STAT3 и увеличения эксперссии гена GDF15 (фактор дифференцировки роста 15).

Поскольку принудительная активация ТАК1 индуцирует синтез белка, не влияя на фосфорилирование mTOR, авторы попытались исследовать, может ли ТАК1 спасти синтез белка в культивируемых при ингибировании mTOR. Культивируемые миотрубки подвергали совместной трансдукции с AAV6-TAK1 и AAV6-TAB1 или с AAV6-GFP в течение 48 часов с последующей обработкой рапамициномв течение дополнительных 24 часов. Результаты показали, что рапамицин ингибировал уровни фосфорилированного белка rpS6 и скорость синтеза белка была значительно выше в обработанных рапамицином ТАК1 и ТАВ1-сверхэкспрессирующих культурах по сравнению с соответствующими обработанными рапамицином контрольными культурами, экспрессирующими только GFP. В совокупности эти результаты свидетельствуют о том, что принудительная активация ТАК1 (которую вызывает комплекс №24) стимулирует трансляционый механизм, независимый от mTOR.

В свою очередь, в опытах инактивация ТАК1 приводит к нарушениям NMJ и мышечной атрофии. Структурные изменения наряду с функциональными изменениями приводят к нарушению нервно-мышечного соединения (NMJ) при многих нейродегенеративных заболеваниях и старении. Ранее авторы сообщали, что целенаправленная индуцируемая инактивация ТАК1 у взрослых мышей приводит к серьезному истощению мышц и кифозу, которые напоминают возрастное истощение мышц. Используя мышечных мышей с нокаутом ТАК1, индуцируемым тамоксифеном (ТАK1mKO), авторы исследовали, играет ли ТАК1 какую-либо роль в поддержании целостности NMJ у мышей. Мышей ТАК1 (Так1fl/fl) и Tak1Mko (Tak1fl/fl, HAS-MCM), подвергнутых флоксу, лечили тамоксифеном в течение 4 дней подряд. После этого мышей кормили кормом, содержащим тамоксифен, в течение следующих 24 дней. Наконец, мышей подвергали эвтаназии, выделяли отдельные мышцы и задних конечностей и проанализировали морфологическими и биохимическими методами. В соответствии с ранее опубликованными отчетами авторов, у мышей Tak1mKO наблюдалось значительное снижение среднего CSA миофибрилл по сравнению с мышами Tak1fl/fl.

NMJ позвоночных состоит из пресинаптического нервного окончания, внутрисинаптической базальной пластинки (синаптической щели), постсинаптической специализации (моторнаяконцевая пластина мышечного волокна) и пресинаптических шванновских клеток. Авторы исследовали влияние специфичной для мышц инактивации ТАК1 на морфологию NMJ. Продольные срезы, полученные из ТА-мышцы мышей Tak1fl/fl и Tak1mKO, были окрашены конъюгированными α-bungaro-toxin Alexa 488 антителами против нейрофиламентов (NF-M) и белка синаптических пузырьков 2 (SV2) и DAPI. Компоненты NMJ были проанализированы в соответствии со стандартизованной методологией, основанной на Image-J, NMJ-morph. Авторы наблюдали грубое нарушение в постсинаптической области NMJ у мышей Tak1mKO по сравнению с однопометными мышами Tak1fl/fl. NMJ мышей Tak1mKO наблюдалась повышенная фрагментация NMJs по сравнению с мышамиTak1fl/fl. Некоторые концевые пластины в Tak1 мыши mKO были странно меньше, тогда как некоторые были крупнее, но с обширной фрагментацией. Напротив, параметры пресинаптической области, такие как диаметр аксонов, площадь нервных окончаний, средняя длина ветвей и индекс сложности, оставались сопоставимыми у мышей Таk1fl/fl и Tak1mKO.

Накопленные данные свидетельствуют о том, что передача сигналов Smad играет важную роль в регуляции массы скелетных мышц в условиях роста и атрофии мышц. Было обнаружено, что отрицательные регуляторы роста, такие как миостатин и активины, подавляют активацию Akt/mTOR через Smad2/3. И, наоборот, лиганды семейства BMP интегрируют Smad1 и Smad4 для положительной регуляции массы скелетных мышц, особенно в денервированных мышцах. Несколько исследований показали, что TAK1 играет роль в регуляции передачи сигналов Smad во время остеогенеза, хондрогенеза. Существует ли такое взаимодействие между сигналами TAK1 иSmadрегуляции массы скелетных мышц, ранее не исследовалось. Результаты авторов исследования показали значительное увеличение фосфорилирования как специфичного для BMP Smad1/5/8, так и специфичного для TGF-B Smad у мышей Tak1mKO по сравнению с однопометными мышами Tak1fl/fl. Авторы также наблюдали значительное увеличение уровней общего Smad1 и Smad2 в скелетных мышцах мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Однако не было заметной разницы в уровнях Smad4 и Smad6.

Чтобы лучше понять механизма активации R-smads (то есть Smad1/5/8 и Smad2/3) после инактивацииTAK1в скелетных мышцах мышей, авторы измерили уровни mPHK лигандов подсемейства BMP и TGF-B и их рецепторов. Интересно, чтоALK3 (Bmpr1a), ALK6 (Bmpr1b) и Bmpr2, рецепторы, участвующие в активации осиBMP-Smad1/5/8, а также рецепторы ALK4 (Acvr1b), ALK7 (Acvr1c) и Tgfbr2, связанные с активаций плеча TGFB-Smad2/3, оказалась значительно повышена регуляция в мышцах GA мышей Tak1mKOпо сравнению с мышами Tak1fl/fl. Кроме того, наблюдалось значительное увеличение уровней mPHK Bmp4, Bmp7, Bmp8а, Bmp8b, Bmp13 (gdf6), Bmp14 (Gdf5) и Bmp15 в мышцах GA мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Напротив, уровниmPHK Bmp2, Bmp3, Bm5, Bmp6, Bmp11 (Gdf11), Bmp12 (Gdf7), миостатина (Mstn), ингибина бета А (Inhba), рецепторов Acvr2a и Acvr2bоставались сопоставимыми в мышцах GA мышей Tak1fl/fl и Tak1mKO.

В опытах целенаправленная инактивация ТАК1 нарушает передачу сигналов Smad в скелетных мышцах.

ТАК1 взаимодействует с Smad1 при денервации для предотвращения чрезмерной атрофии мышц. Известно, что передача сигналов Smad, опосредованная ТАК1, зависит от типа клеток и зависит от контекста. В скелетных мышцах активация сигнальной оси Smad1/5/8 действует как компенсаторный путь для предотвращения чрезмерного истощения мышц во время денервации. Ранее авторы наблюдали, что целенаправленное удаление ТАК1 усугубляет вызванную денервацией мышечную атрофию у мышей. Основываясь на результатах авторов в исследовании, показывающих резкий дисбаланс в передаче сигналов Smad, активацию оси HDAC4-миогенин и нарушение NMJ при удалении Tak1, авторы предположили, что передача сигналовTAK1 регулирует массу скелетных мышц в ответ на денервацию. Чтобы проверить эту гипотезу, авторы сначала провели эксперимент по совместной иммунопреципитации для оценки взаимодействия между ТАК1 и белком Smad1 в деневированных скелетных мышцах мышей. Результаты показали значительное обогащение Smad1 при иммунопреципитации антителом к ТАК1. Напротив, авторы не обнаружили никакого взаимодействия между ТАК1 и Smad4 в контрольных или денервированных мышцах.

ТАК1 регулирует передачу сигналов Smad в денервированных мышцах для облегчения атрофии.

Опубликованные отчеты предполагают, что взаимодействие между ТАК1 и белком Smad точно настраивает результат передачи сигналов Smad. В денервированных мышцах лиганды ВМР связываются с их рецепторами и индуцируют фософрилирование Smad1, которое подавляет экспрессию генов различных ятрогенов. Авторы предполагают, что взаимодействие ТАК1 и Smad1 необходимо для опосредованной Smad1 профилактики чрезмерной мышечной атрофии во время денервации. Чтобы проверить эту гипотезу, мышей Таk1fl/fl и мышей Tak1mKO лечили тамоксифеном в течение четырех дней подряд для удаления гена Таk1 в скелетных мышцах, а затем мышей подвергали операции денервации. На 7-й день после денервации авторы обнаружили, что вызванная денервацией потеря мышечной массы ТА и GA (нормализованная по массе тела) была выше у мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Вестерн-блот-анализ показал, что уровни MAFbx и MuRF1 были значительно выше в денервированных мышцах мышей TAk1mKO, по сравнению с соответствующими денервированными мышцами мышейTak1fl/fl. Кроме того, наблюдалось значительное увеличение относительного уровняmPHK Musal (Fbxo30)в денервированной мышце GA Tak1 мыши mKO по сравнению с денервированными мышцами Tak1мышей fl/fl. Кроме того, также наблюдалось значительне увеличение количества конъюгированных с убиквитином белков в денервировнной мышце GAмышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Интересно, что авторы также наблюдали значительное увеличение уровней p-Smad1/5/8 в денервированных мышцах мышей Tak1mKO по сравнению с денервированными мышцами мышей Tak1fl/fl. Напротив, не было существенной разницы в уровняхSmad1, p-Smad2, Smad4 и Smad6 между денервированными мышцами мышей Tak1mKO и Tak1fl/fl.BMP-опосредованное фосфорилирование Smad1 ограничивает экспрессиюMAFbx, MuRF1 иMUSA1 во время денервации. Результаты исследований показывают, что TAK1 способствует Smad1-опосредованному подавлению экспрессииMAFbx,MuRF1 иMUSA1.

Авторы также оценили активацию ключевых регуляторов механизма трансляции белка. Значительное увеличение уровней белка p-IF4E, p-rpS6 наблюдалось в денервированных мышцах GA по сравнению с иннервированными мышцами GAмышей Таk1fl/fl. Интересно, что инактивация TAK1 значительно уменьшала вызванное денервацией увеличение уровнейp-tIF4E, но неp-rpS6 в мышцах GA мышей. В целом, эти результаты демонстрируют, что TAK1взаимодействует с Smad1 для ингибирования экспрессии генов мышечно-специфических убиквитинлигаз Е3 и стимулирует механизм трансляции белка в скелетных мышцах.

ТАК1 регулирует субклеточное распределение белков Smad в денервированных скелетных мышцах.

В дополнение к статусу фосфорилирования R-Smads (то есть Smad1/5/8 иSmad2/3), их способность образовывать многобелковые комплексы сCo-Smad (то есть Smad4) и I-Smads ( то есть Smad6 и 7), а также субклеточное расположение комплексаSmad, влияние и определениеконечных последствий передачи сигналов Smad. Поэтому авторы изучили субклеточное распределение Smads в скелетных мышцах мышей Tak1fl/fl иTakqmKO в ответ на денервацию. Авторы измерили уровни различных белков Smad в ядерныхи цитозольных фракциях иннервированных и денервированных мышц GA мышей Tak1fl/fl и Tak1mKO. Результаты показали, что наблюдалось значительное увеличение уровней p-Smad1/5/8 в ядерной фракции денервированной мышцы GA мышей Tak1fl/fl, так и мышей Tak1mKO по сравнению с коллатеральной контрольной мышцей GA. Интересно, что авторы также обнаружили значительное увеличение уровня ядерного Smad4 в денервированной мышце GA мышей TAk1fl/fl по сравнению с иннервированной мышцей GA мышей Tak1fl/fl.

Однако такого увеличения уровней Smad4 в ядерной фракции денервированных мышщ GА мышей Tak1mKO не было заметно.

Значительно более высокие уровни Smad6 наблюдались в ядерной фракции денервированной мышцы GA мышей Tak1mKOпо сравнению с денервированной мышцей GA мышей Tak1fl/fl. Это различие в ядерномSmad6 между Tak1fl/fl и Tak1mKO также наблюдалось в иннервируемых мышцах. В цитоплазматической фракции p-Smad1/5/8 был значительно повышен в денервированной мышце GA мышей Tak1mKO по сравнению с контрольной мышцей GA. Не было заметной разницы в уровнях Smad4 в цитозольных фракциях денервированных мышц GA мышей Tak1fl/flи Tak1mKO. Соответственно, было обнаружено, что цитозольные уровниSmad6 значительно ниже в денервированной мышце GA мышей Tak1mKO по сравнению со всеми другими генотипами. Белок GAPDH присутствует как в цитоплазме, так и в ядерных экстрактах, тогда как Lamin B1 используется вкачестве регулятора нагрузки для ядерных экстрактов. Результаты авторов показали, что GADPH был обогащен цитоплазматическими экстрактами, тогда какLaminB1 был преимущественно обогащен ядерными экстрактами, что подтверждает чистоту цитоплазматических и ядерных экстрактов. Результаты исследований показывают, что ТАК1 регулирует пространственное распределение Smad1, Smad4 и Smad6 в денервированных мышцах. TAK1 поддерживает ядерную транслокацию Smad4 и цитозольное удержание белка Smad6 в денервированных мышцах.

Лиганды BMP индуцируют фосфорилирование TAK1 в скелетных мышцах. Сначала авторы измерили, как уровни некоторых ключевых лигандов BMP были затронуты в скелетных мышцах мышей Tak1fl/fl иTak1mKO в ответ на денервацию. Анализ qPCR показал, что уровни mPHK как Bmp13, так и Bmp14 были резко увеличены в скелетных мышцах во время денервации. Более того, уровни Bmp13 были значительно выше в денервированной мышце мышей Tak1mKO по сравнению с соответствующей денервированной мышцей Tak1fl/fl. Затем, авторы попытались исследовать, активируют ли BMP-лигандыTAK1 и требуется ли TAK1 для индуцированного BMР фосфорилированияSmad1/5/8 в скелетных мышцах. Первичные миобласты мыши дифференцировали в миотрубки путем инкубации в дифференцировочной среде в течение 72 часов. Затем миотрубки предварительно обрабатывали 5Z-7-оксозеанолом (5-Z7O), хорошо известным фармакологическим ингибитором ферментативной активности ТАК1 с последующим добавлением рекомбинантного белка ВМР7 или ВМР13. Вестерн-блоттинг-анализ показал, что обработка либо ВМР7, либо ВМР13 увеличивала фосфорилирование ТАК1 и Smad1/5/8 в культивируемых миотрубках. Однако индуцируемая BMР7 или ВМР13 активация p-Smad1/5/8 была значительно снижена в миотрубках, предварительно обработанных 5-Z7O. Как и ожидалось, 5-Z7O притупил фосфорилирование TAK1 в ответ наBMP7 или BMP13.

В качестве дополнительного подхода авторы также исследовали эффект нокдауна ТАК1 при индуцированной ВМР активации Smad1/5/8 в миотрубках. Первичные миотрубки мыши трансдуцировали аденовирусными конструкциями, экспрессирующими либо скремблированную короткую шпильковуюPHK (shRNA), либо Tak1 shRNA вместе с GFР. Было обнаружено, что через 48 часов уровни mPHK Tak1 резко снижаются в культурах, трансдуцированных аденовирусными конструкциями, экспрессирующими Tak1 shRNA. В параллельном эксперименте миотрубки, экспрессирующие контрольную или Tak1 shRNA, обрабатывали рекомбинантнымбелкомВМР7илиВМР13втечение30минут, и уровни

p-Smad1/5/8 измеряли с помощью вестерн-блоттинга. Результаты показали, что нокдаун ТАК1 снижает индуцированное ВМР7 или ВМР13 фосфорилирование p-Smad1/5/8 в культивируемых миотрубках. Вестерн-блоттинг-анализ авторов подтвердил, что белок ТАК1 был значительно снижен в культурах, трансдуцированных Ad.shRNA TAK1. Взятые вместе, эти результаты свидетельствуют о том, что ТАК1 способствует передаче сигналов

Smad1, индуцированных ВМР, в скелетных мышцах.

Принудительная активация ТАК1 уменьшает вызванное денервацией истощение мышц. Предыдущие результаты авторов выявили критическую регуляторную роль ТАК1 в предотвращении чрезмерной потери мышечной массы во время денервации. Чтобы дополнительно подтвердить стимулирующие рост эффекты ТАК1 и его роль в предотвращении чрезмерного истощения мышц во время нейрогенной атрофии, авторы изучили эффект принудительной активации ТАК1 при мышечной атрофии, вызванной денервацией. Мышам дикого типа вводили внутримышечную инъекцию либо AAV6-GFP (2,5×1010 вг), либо комбинации AAV6-TAK1 (1,25×1010 вг) и AAV6-TAB1 (1,25×1010 вг) в обе ТА-мышцы. После 14 дней внутримышечной инъекции AAVs на левой ноге была проведена операция по денервации, тогда как правая нога была фиктивно прооперирована. Через 7 дней или 14 дней мышей подвергли эвтаназии, а мышцу ТА выделяли и использовали для морфологического и биохимического анализа. Интересно, что избыточная экспрессия ТАК1 и ТАВ1, но не GFP, уменьшала потерю массы мышц ТА во влажном состоянии на 7-й день после денервации. Затем авторы провели иммуноокрашивание на белок дистрофин с последующим количественным определением CSA миофибрилл. Этот анализ показал, что среднее значение CSA миофибрилл было значительно выше в мышцах AAV6-TAK1 и AAV6-TAB1, которым вводили 7d-денервированную мышцу TA, по сравнению с мышцами AAV6-GFP, которым вводили 7d-денервированную TA мышцу мышей. Действительно, средняя CSA миофибрилл денервированной мышцы TA, которой вводили AAV6-TAK1 и AAV6-TAB1, была сопоставима с иннервированной TA, введенной AAV6-GFP, а также с коллатеральной AAV6-TAK1 и с одновременной инъекцией ТА. Относительное распределение частот миофибрилл также продемонстрировало более высокий процент миофибрилл с большим CSA в мышцах ТА, введенных AAV6-TAК1 и AAV6-TAB1, по сравнению с мышцами ТА, введенными AAV6-GFP, на 7-й день после денервации. В другом эксперименте авторы наблюдали, что среднее значение CSA миофибрилл также было значительно выше в мышцах, сверхэкспрессирующих TA TAK1 и TAB1, по сравнению с мышцами, сверхэкспрессирующими TA GFP, на 14-й день после денервации. окрашивание H и E срезов мышц TA показало, что сверхэкспрессия TAK1 и TAB1 не вызывала какого-либо явного эффекта в контрольных или 14-d денервированных мышцах мышей.

Принудительная активация TAK1 смягчает мышечную атрофию, вызванную денервацией.

Вестерн-блот-анализ показал сходные уровни p-mTOR, p-Smad1/5/8, p-Smad2, p-rpS6 и общего Smad1, общего Smad2 и общего rpS6 между иннервированными и денервированными TA мышцами, получающими либо AAV6-GFP, либо AAV6-TAK1 и AAV6-TAB1. Интересно, что наблюдалось значительное увеличение уровней p-Mnk1 и p-eIF4Е в денервированных мышцах ТА, которым вводили AAV6-TAK1 и AAV6-TAB1, по сравнению с денервированными мышцами, которым вводили AAV6-GFP. В совокупности эти результаты свидетельствуют о том, что принудительная активация ТАК1 смягчает нейрогенную мышечную атрофию потенциально за счет активации Mnk1-зависимой стимуляции механизма трансляции белка.

Истощение скелетных мышц происходит при нескольких болезненных состояниях и нервно-мышечных расстройствах. В настоящее время становится все более очевидным, что сложная сигнальная сеть регулирует массу скелетных мышц в различных условиях. ТАК1 вместе со своими партнерами по связыванию ТАВ1, ТАВ2 и ТАВ3 составляют важную сигналосому, которая точно настраивает активацию нескольких внутриклеточных сигнальных путей во время эмбрионального развития и на протяжении всей жизни организма. ТАК1 является известной восходящей киназой, которая регулирует активацию катаболических сигнальных путей, таких как NF-Kb и p38MAPK, в ответ на воспалительные цитокины и бактериальные продукты. Однако авторы обнаружили, что ТАК1 необходим для поддержания массы скелетных мышц и роста скелетных мышц, вызванного перегрузкой. В авторитетном исследовании авторы сообщают, что супрафизиологической активации ТАК1 достаточно, чтобы вызвать гипертрофию миофибрилл. Что еще более важно, авторы обнаружили, что ТАК1 необходим для поддержания NMJ, а принудительная активация ТАК1 смягчает вызванную денервацией атрофию скелетных мышц.

Рост мышц поддерживается повышенным синтезом белка и биогенезом органелл. Скорость синтеза белка зависит от образования гетеротримерногокомплекса eIF4E стадии инициации трансляции. Доступность eIF4E является критическим шагом для образования комплексаeIF4E, который напрямую связывает 5-колпачок mPNK с другими ассоциированными факторами и инициирует трансляцию. Активность eIF4E-опосредованного синтеза белка строго контролируется, и он остается неактивным при связывании с eIF4E-связывающими белками (4Е-BPs). В ответ на стимулы роста mTORC1-опосредованное фосфорилирование 4Е-BPs высвобождает eIF4E для инициации трансляции белка. Однако активация пути mTORC1 – не единственный механизм, инициирующий синтез белка. Например, фосфорилирование eIF4E в Ser209 с помощью Mnk1 и Mnk2 также стимулирует синтез белка в ответ на митогенные стимулы. Кроме того, рибосомный белок S6 (rpS6) является доминирующим фактором, определяющим биогенез рибосом и синтез белка. Внеклеточные стимулы роста вызывают быстрое фосфорилирование rpS6, опосредованное m-TOR-p70S6K, что положительно влияет на размер, пролиферацию или дифференцировку клеток. Кроме того, несколько митогенов и факторов активируют ERK1/2 и p38MAPKs, которые непосредственно фосфорилируют и активируют p90RSK во многих типах клеток. Активированный p90RSK фосфорилирует киназу rpS6, которая впоследствии инициирует Сар-зависимую трансляцию белка и биогенез рибосом. Результаты исследований показали, что сверхэкспрессия ТАК1 и ТАВ1 вызывает повышенное фосфорилирование ТАК1 в домене активации. Более того, активация ТАК1 индуцирует фосфорилирование р38МАРК, MnK1, p90RSK, rpS6 и eIF4E и увеличивает уровни белка нескольких других EIF в скелетных мышцах и культивируемых миотрубках. Фосфорилирование eIF2а блокирует сар-зависимую трансляцию белка, и подавляет глобальный синтез белка. Интересно, что значительное снижение фосфорилирования eIF2а было заметно в мышцах, сверхэкспрессирующих ТА ТАК1/ТАВ1. Доказано, что принудительная активация ТАК1 стимулирует механизм трансляции белка, не оказывая особого влияния на mTOR или p70S6K. Эти результаты свидетельствуют о том, что роль mTOR в опосредовании синтеза белка и гипертрофии скелетных мышц не обязательна и может быть достигнута за счет активации ТАК1, которую вызывает пептидный пул комплекса №24.

В дегенерированных мышцах наблюдается значительное увеличение уровней фосфорилирования eIF4E и rpS6, что является механизмом стимуляции синтеза белка и предотвращения чрезмерной потери мышечной массы. Было обнаружено, что потеря питания нервов в скелетных мышцах увеличивает скорость синтеза белка. Интересно, что фосфорилирование eIF4E при денервации отсутствовало у мышей с удалением Так1 и было значительно повышено в мышцах, сверхэкспрессирующих ТАК1-ТАВ. Однако, на статус фосфорилирования rpS6 в денервированных мышцах не влияла делеция или сверхэкспрессия Так1. Эти результаты показывают, что eIF4E-опосредованный синтез белка во время роста мышечной массы в первую очередь регулируется ТАК1.

Было обнаружено, что передача сигналов NF-Kb и p38MAPK вызывает истощение мышц при многих состояниях, особенно при хронических заболеваниях. Провоспалительные цитокины и продукты жизнедеятельности микроорганизмов активируют NF-Kb и p38MAPK посредством восходящей активации ТАК1. Принудительная активация ТАК1 стимулирует рост миофибрилл без признаков воспаления или фиброза, даже несмотря на то, что ТАК1 увеличивает фосфорилирование субъединицы р65 NF-kB и p38MAPK в скелетных мышцах. Эти результаты согласуются с опубликованными отчетами, указывающими, что NF-kB и p38MAPK способствуют росту и гомеостазу скелетных мышц в физиологических условиях. Следовательно, активация только ТАК1 и его нижестоящих эффекторов, таких как NF-kB p38MAPK, способствует росту и активации скелетных мышц в наивных условиях. ТАК1 под действием комплекса №24 активируется наряду с другими положительными регуляторами мышечной массы во время гипертрофии, вызванной перегрузкой. Кроме того, ТАК1 взаимодействует с Smad1 в денервированных мышцах, что может быть механизмом предотвращения истощения мышц. Результаты, демонстрирующие, что индуцированное ВМР-фосфорилирование Smad1/5/8 снижалось при фармакологическом ингибировании или нокдауне ТАК1 в культивируемых микротрубках дополнительно указывают на стимулирующую рост роль ТАК1 в скелетных мышцах во время катаболических периодов. Саркопения и атрофия мышц, влияющие на гомеостаз NMJ, являются загадочной концепцией. Результаты исследований, демонстрирующие нарушения морфологии NMJ и повышенную экспрессию гена NMJ Tak1mKO, указывают на то, что ТАК1 играет важную роль в поддержании здоровья NMJ. Недавние исследования показали, что аутофагия и убиквитин-протеасомная система регулируют оборот никотиновых ацетилхолиновых рецепторов в скелетных мышцах во время катаболического периода. Семейство транскрипционных факторов FoxO опосредует вызванное денервацией истощение мышц путем усиления экспрессии генов компонентов аутофагии-лизосомальной системы и убиквитинлигаз Е3, таких как MAFbx и MuRF1. Кроме того, ось HDAC4-Dach2-миогенин увеличивает уровни MAFbx и MuRF1 во время нейрогенной атрофии. Результаты исследований демонстрируют, что целенаправленнаяинактивация ТАК1 повышает уровни белков FoxO, HDAC4 и миогенина, которые являются признаками мышечной атрофии, вызванной денервацией. Хотя точные механизмы остаются неизвестными, возможно, что повышенный окислительный стресс в мышцах с дефицитом Тak1 приводит к дегенерации NMJs, аналогичной старению. Действительно, ранее сообщалось, что инактивация ТАК1 вызывает окислительный стресс и митохондриальную дисфункцию в скелетных мышцах, а хроническое введение антиоксидантов улучшает мышечную массу и сократительную функцию у мышейTak1mKO.

Результаты исследований демонстрируют, что сигнальная ось Smad резко нарушается в скелетных мышцах при инактивации ТАК1. При инактивации ТАК1 в наивных условиях наблюдалось значительное увеличение уровней фосфорилированного Smad1/5/8, а также фосфорилированного Smad2 в скелетных мышцах. Используя анализы совместной иммунопреципитации, авторы выявили сильное физическое взаимодействие между белками ТАК1 и

Smad1 в денервированной мышце, которое было менее выражено в иннервированной мышце. Необходимость физического взаимодействия ТАК1 и Smad1 была дополнительно подтверждена, когда авторы наблюдали более изнурительную атрофию при денервации у мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Интересно, что авторы обнаружили, что уровни фосфорилированного белка Smad1 (р-Smad1) значительно повышены в денервированных мышцах мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl. Известно, что активация Smad1, вызванная ВМР13/ВМР14, подавляет протеолиз мышц во время нейрогенной атрофии. Однако результаты исследований показывают, что в отсутствие ТАК1 компенсаторное повышение уровня р-Smad1 не может предотвратить активацию компонентов убиквитин—протеасомной системы. Более того, ТАК1, регулирующий пространственное распределение белков Smad, возможно, может влиять на результат передачи сигналов Smad. Хотя авторы обнаружили большую ядерную локализацию р-Smad1/5/8 в денервированных мышцах мышей Tak1mKO по сравнению с мышами Tak1fl/fl, это сопровождалось значительно меньшим уровнем ядерного Smad4 и более высоким уровнем ядерного Smad6. Фактически, результаты исследований показывают, что функциональный ТАК1 облегчает ядерную локализацию со-smad Smad4 и цитозольное удержание ингибирующего smad, Smad6, в денервированных мышцах. Недавние исследования показали, что пути Smad2/3 b Smad1/5/8 оказывают противоположное воздействие на массу скелетных мышц. Эксперименты показали, что фосфорилирование как Smad1/5/8, так и Smad2 усиливаются в скелетных мышцах во время гипертрофии, вызванной перегрузкой, и атрофии, вызванной денервацией. Причина активации Smad2/3 во время мышечной гипертрофии неуловима.

В некоторых экспериментальных моделях ВМР активации неканонической передачи сигналов Smad через ТАК1. Авторы наблюдали, что инактивация ТАК1 в скелетных мышцах мышей приводит к более высокой экспрессии гена Вmp13 во время денервации. Интересно, что результаты исследований демонстрируют, что рекомбинантный ВМР7 или ВМР13 может вызвать фосфорилирование ТАК1 вместе с Smad1/5/8 в культивируемых микротрубках. Эти результаты свидетельствуют о том, что исключительное увеличение лигандов ВМР при денервации может также служить механизмом активации ТАК1, который, в свою очередь, предотвращает чрезмерную потерю мышц, стимулируя компоненты механизма трансляции белка. Действительно, роль ТАК1 в предотвращении нейрогенного истощения мышц была также подтверждена экспериментами, демонстрирующими, что сверхэкспрессия ТАК1 и ТАВ1 притупляет мышечную атрофию, вызванную денервацией. Авторы также наблюдали, что уровни p-Mnk1 и p-IF4E, но нер-mTOR, были значительно выше в ТАК1/ТАВ1, сверэкспрессирующие денервированные мышцы мышей дополнительно предполагают, что супрафизиологическая активация ТАК1 ингибирует истощение мышц потенциально за счет активации механизма трансляции белка.

Кахексия – разрушительный многофакторный синдром, наблюдаемый у пациентов с раком на поздней стадии, включает в себя тяжелое истощение мышц. Недавнее исследование продемонстрировало, что дегенерация NMJ, сопровождающаяся подавлением передачи сигналов ВМР-Smad1/5/8, предшествует началу истощения мышц на моделях раковой кахексии. Важно отметить, что принудительная активация ВМР-Smad1/5/8 пути с использованием молекулярных или фармакологических подходов уменьшает истощение мышц и выживаемость у мышей с опухолями. Результаты исследований выявили перекрестные помехи между передачей сигналов ТАК1 и ВМР-Smad1/5/8 во время нейрогенной атрофии, что способствует проведению будущих исследований по изучению участия ТАК1 в гомеостазе NMJ при раковой кахексии и других состояниях истощения мышей.

В совокупности результаты исследований демонстрируют, что супрафизиологическая активация ТАК1 с использованием комплекса №24 поддерживает рост скелетных мышц. Хотя для понимания механизмов действия ТАК1 в скелетных мышцах необходимы дополнительные исследования, наши исследования обеспечивают основу для применения пептидов комплекса №24, которые могут специфически активировать ТАК1 для увеличения массы скелетных мышц и предотвращения атрофии.

Форма выпуска: 30 капсул по 350 мг.
Способ применения: по 1 капсуле 1 раз в день во время еды, запивая водой. Курс – 30 дней. При необходимости курс можно повторить.
Ограничения: индивидуальная непереносимость компонентов, беременность, кормление грудью.